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实时荧光定量PCR标准品稀释法

发布时间:2020-07-19   点击次数:96次

实时荧光定量PCR是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料,利用荧光信号积累对PCR反应的过程,进行实时监控实现起始模板的准确定量。实时荧光定量PCR标准品梯度稀释方法依次是选择目标、提取/PCR、纯化、测试浓度、调整浓度、梯度稀释。一般CT值在18-30之间,覆盖全部样品浓度区间。和大家在分享一下10倍连续梯度稀释方法:1V原液(标准品为i+9V稀释缓冲液,得到标准品为ii1V标准品ii+9V稀释缓冲液,得到标准品为iii, 1V标准品iii+9V稀释缓冲液,得到标准品为iv, 1V标准品iv+9V稀释缓冲液v,切不可用标准品i分别加不同体积的稀释缓冲液直接得到标准品iiiiiivv,标准品要复管做测试,复管次数要遵循统计学要求。荧光PCR冻干时,制品溶液厚度不宜过厚。一般应为10-15mm,制品过厚的情形类似于浓度过高时的情况,不仅干燥的时间更长,塌陷、结块。冻干机Pilot3-6T医疗应用涉及产品有:荧光PCR、免疫微球、化学发光、基因芯片、量子点、ELISA、胶体金、POCTIVD校准品质控品校准品、内毒素检测试剂、血清、白蛋白、干细胞及相应提取物等。

型号

Pilot3-6T

Pilot5-8T

Pilot7-12T

Pilot10-15T

冻干面积

0.42

0.56

0.84

1.05

22西林瓶装量(20ML

≥900

≥1170

≥1500

≥2100

16西林瓶装量(5ML

≥1700

≥2210

≥3100

≥4100

冷阱温度(空载)

-85

真空度(空载)

≤1Pa

板层温度(空载)

-55

板层制冷方式

硅油循环

板层数量

3+1

4+1

4+1

5+1

板层尺寸(mm

350*400

350*400

350*600

350*600

捕水能力

6L

8L

12L

10L

冻干效率

3L/24H

5L/24H

7L/24H

10L/24H

板层间距

100mm

80mm

90mm

100mm

穿墙隔离

冻干曲线拟合度

100%

100%

100%

100%

晶型控制

蒸汽分压控制

升华结束判定

冻干终点测试

压塞

液压

整机尺寸 (约)

W860*D1400*H1800

W860*D1400*H1800

W860*D1700*H1900

W860*D1700*H1900

 

 

 

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