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实时荧光定量PCR是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料，利用荧光信号积累对PCR反应的过程，进行实时监控实现起始模板的准确定量。实时荧光定量PCR标准品梯度稀释方法依次是选择目标、提取/PCR、纯化、测试浓度、调整浓度、梯度稀释。一般CT值在18-30之间，覆盖全部样品浓度区间。和大家在分享一下10倍连续梯度稀释方法：1V原液（标准品为i）+9V稀释缓冲液，得到标准品为ii。1V标准品ii+9V稀释缓冲液，得到标准品为iii, 1V标准品iii+9V稀释缓冲液，得到标准品为iv, 1V标准品iv+9V稀释缓冲液v,切不可用标准品i分别加不同体积的稀释缓冲液直接得到标准品ii、iii、iv、v，标准品要复管做测试，复管次数要遵循统计学要求。荧光PCR冻干时，制品溶液厚度不宜过厚。一般应为10-15mm，制品过厚的情形类似于浓度过高时的情况，不仅干燥的时间更长，塌陷、结块。冻干机Pilot3-6T医疗应用涉及产品有：荧光PCR、免疫微球、化学发光、基因芯片、量子点、ELISA、胶体金、POCT、IVD校准品质控品校准品、内毒素检测试剂、血清、白蛋白、干细胞及相应提取物等。
型号 | Pilot3-6T | Pilot5-8T | Pilot7-12T | Pilot10-15T |
冻干面积 | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶装量（20ML） | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶装量（5ML） | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱温度（空载） | -85℃ | |||
真空度（空载） | ≤1Pa | |||
板层温度（空载） | -55℃ | |||
板层制冷方式 | 硅油循环 | |||
板层数量 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板层尺寸（mm） | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 6L | 8L | 12L | 10L |
冻干效率 | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板层间距 | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墙隔离 | √ | √ | √ | √ |
冻干曲线拟合度 | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分压控制 | √ | √ | √ | √ |
升华结束判定 | √ | √ | √ | √ |
冻干终点测试 | √ | √ | √ | √ |
压塞 | 液压 | |||
整机尺寸 （约） | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |
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