外泌体制品中应尽量减少游离蛋白、聚合酶(如RNase)和杂质的存在,建议使用纯化后的外泌体(通过超速离心、尺寸排阻色谱法SEC纯化)。外泌体制品浓度要适宜,一般在1e10 - 1e11 particles/mL范围内较为常见。外泌体制品包材选用低蛋白吸附的冻存管或西林瓶。每管的分装体积不宜过大或过小。通常0.5 - 2 mL较为合适,以确保热传导和干燥效率。体积过大可能导致干燥不完。
外泌体冻干工艺过程中的要点:
1. 预冻时快速冷冻(>1°C/min)有助于形成小冰晶,减少对外泌体膜的机械损伤。
2.一次干燥板层温度要适合,建议设定在 -30°C 至 -45°C 之间,合适的真空是升华的动力。
3. 冻干总时长具体取决于样品体积和配方。必须确保所有冰晶升华。
外泌体冻干时要选择适合的冻干机,一批冻干量要满足前期生产每批2100瓶,放大生产至少1万瓶的产能,外泌体冻干机整机为304不锈钢材质,前箱后阱,洁净度好,可做穿墙,可连续长时间运行,技术服务带有冻干工艺摸索,冻干工艺优化,冻干生产放大等。另外外泌体冻干机整机性价比好,使用寿命在15年以上。外泌体冻干机出口澳大利亚、德国、英国、美国等,冻干机出口时可提供远程的冻干工艺技术指导,远程的设备操作使用维护等。