荧光PCR实验的关键步骤

发布时间：2020-07-16 点击次数：1331次

荧光定量PCR实验时所需的耗材有八连管，光学级八连管盖子，光学级96孔板封膜，96孔板等。荧光定量PCR实验过程分为RAN的提取，反转录, 荧光定量PCR反应, 数据分析。做荧光定量PCR实验有几个关键步骤需要注意1.应有合适数目的生物学重复及正确的对照样品设置2.样品的获得应按照实验流程中对采样，处理和保存的要求及确保重复性并减小重复样品间的标准偏差。3对RAN的纯度和完整性进行质量控制。4.将总RAN反转录成cDNA的反转录反应。5.试验中正确的引物设计，引物退火温度确定，基因扩增效率摸索。6.实验数据分析中内参基因选择和统计方法计算。在做荧光定量PCR实验过程中冻干工艺优化也起着重要作用。需要选择适合的冻干机，如Pilot10-15EP解决用户对冻干曲线不熟练的问题,缩短研发、小试周期, 提高冻干产品的一致性,解决用户在应用当中的技术问题。