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实时荧光定量PCR实验时的注意事项

发布时间:2020-07-17   点击次数:105次

实时荧光定量PCR实验需要先制备混合反应液,大剂量包装的反应试剂,使用前进行分装,尽量减少试剂的反复冻融。建议所有样本要有三个重复。实验操作过程时需注意以下几点,有利于避免实验污染问题。1.用稀释的漂白剂或净化剂擦拭净化台。2.在指定的配有紫外灯超净式或者超静台中准备样品,理想的是样品的准备与PCR的扩增分开在不同的区域完成。3.在样品制备和配制反应过程中要勤换手头。4.勤用稀释的漂白剂擦拭移液器。5.只使用PCR级的水和PCR专用试剂进行PCR实验。5. 用带旋盖的 EP 管稀释和配制反应液。6. 在进行 PCR 实验时,还应准备一个无模板的对照来验证有无污染发生,而且用热启动酶防止反应开始之前的非特异性扩增。在选择适合做荧光定量PCR试剂冻干的冻干机时,,要具有完整的PAT控制技术,可对冻干过程进行完整的控制和分析监控。包括预冻全过程控制、预冻结束判定、升华全过程控制、升华结束判定、解析全过程控制及冻干结束判定。板层温度均一度±1℃。系统极限真空度±1Pa。系统真空泄露率<3Pa.L/S。外界干扰热量屏蔽。共晶点测试仪助力工艺开发。全进口配件。建议提高荧光PCR冻干的相关性。

型号Pilot3-6T Pilot5-8T Pilot7-12T Pilot10-15T
冻干面积0.42㎡0.56㎡0.84㎡1.05㎡
∅22西林瓶装量(20ML)≥900支≥1170支≥1500支≥2100支
∅16西林瓶装量(5ML)≥1700支≥2210支≥3100支≥4100支
冷阱温度(空载)-85℃
真空度(空载)≤1Pa
板层温度(空载)-55℃
板层制冷方式硅油循环
板层数量3+14+14+15+1
板层尺寸(mm)350*400350*400350*600350*600
捕水能力6L8L12L10L
冻干效率3L/24H5L/24H7L/24H10L/24H
板层间距100mm80mm90mm100mm
穿墙隔离
冻干曲线拟合度100%100%100%100%
晶型控制
蒸汽分压控制
升华结束判定
冻干终点测试
压塞液压
整机尺寸 (约)W860*D1400*H1800W860*D1400*H1800W860*D1700*H1900W860*D1700*H1900

 

 

 

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