纤维蛋白原之冻干

纤维蛋白原的提取先将冻好的血浆从低温冷柜中取出，在2~4℃下解冻，解冻血浆在2~4℃下静止2小时，滤网粗滤后1000rpm离心10分钟，弃上清留沉淀，计沉淀体积，加等量的纤原清洗液，在2~4℃条件下，1000rpm离心10分钟，弃上清，留沉淀，计沉淀体积，沉淀主要成分即为纤维蛋白原。冻干溶液配制过程中，冻干保护剂选用蔗糖、甘氨酸或甘露醇的单元、双元或多元组合。蔗糖是一种抗冻剂，在冻干过程中可有效地保护组织或蛋白质分子结构免受冰晶的损伤；而且其冻干后具有相对较高的玻璃化转变温度，可提高产品贮藏的稳定性；甘氨酸和甘露醇是一种填充剂，共晶点温度相对较高，可有效地保持样品冻干过程中的形状，减少样品的的皱缩，提高冻干速率，缩短冻干时间。冻干溶液冻干过程，首先将搁板温度迅速冷却至-5℃，维持20分钟后，再迅速降低搁板的温度至-50℃，等待样品温度降至-45℃并维持1小时后，开始进入一次干燥过程；起动真空系统，待真空度下降至20Pa后，提升搁板温度至-10℃，持续约65小时后，进入二次干燥过程；提升搁板温度至+5℃，持续5小时后，将搁板温度提升至35℃，持续4小时，结束干燥过程，在真空下压盖密封，取出等待检验。